丙酮酸激酶（PK）測試盒（測紅細(xì)胞）

（貨號(hào)：A076-2-1 測紅細(xì)胞）

一、測定原理：

丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）在 ADP 存在下可催化 PEP 產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸再由 LDH 將其轉(zhuǎn)變

為乳酸，同時(shí)將 NADH 變?yōu)?/span> NAD。

二、試劑組成與配制：（50 管/48 樣）

試劑一：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×2 支，-20℃保存，每支用時(shí)加雙蒸水 1.4mL，用不完-20℃以下保存 3～7 天。(如果你的樣本

量少，可以將 1.4mL 再分成 2～3 管放-20℃以下保存，每次取一管用，以免反復(fù)凍融)

試劑三：液體×4 支，4℃保存，不可冷凍，用不完 4℃～8℃保存。

試劑四：粉劑×4 支，-20℃保存，用時(shí)每支加雙蒸水 320µL，用不完-20℃以下保存。

試劑五：粉劑×4 支，-20℃保存，用時(shí)每支加雙蒸水 650µL，用不完-20℃以下保存。

試劑六：穩(wěn)定劑 20mL×1 瓶，4℃保存。

三、操作過程:

1、樣本前處理：

①、50％紅細(xì)胞懸液的制備：取肝素抗凝全血，放冰箱 4℃～8℃自然沉淀，吸棄血漿、白細(xì)胞、血小板部

分，用冷的生理鹽水洗滌紅細(xì)胞 1～3 次，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 5 分鐘，洗完后再用冷的生理鹽水制成

50%紅細(xì)胞懸液(紅細(xì)胞:生理鹽水＝1:1)。

[注]：當(dāng)天若來不及檢測，最好以全血形式 4℃～8℃可保存 4～5 天。如果你的樣本很多，也可以直接吸取離心后沉淀的紅

細(xì)胞制備成 1︰19 的溶血液。

②、1︰19 溶血液的制備：取 50%的紅細(xì)胞懸液 20μL 加試劑六穩(wěn)定劑 180μL，即 1︰9 稀釋后備用。

③、血紅蛋白測定：取 1︰19 溶血液用氰化高鐵血紅蛋白測試試劑進(jìn)行血紅蛋白 Hb 的測定，具體見 Hb

測定說明書。

2、操作表：

丙酮酸激酶（PK）測試盒（測紅細(xì)胞）