黃-嘌呤氧化酶(XOD)測定試劑盒
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黃-嘌呤氧化酶(XOD)測定試劑盒,主要存在于哺乳動物的乳汁及肝脾中,屬需氧脫氫酶類,是體內核酸代謝中的重要酶,在肝細胞損傷時,此酶早于 SGPT 釋放于血清中,并且升高明顯。
黃-嘌呤氧化酶(XOD)測定試劑盒
(比色法)
一、測定意義:
黃-嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase XOD)主要存在于哺
乳動物的乳汁及肝脾中,屬需氧脫氫酶類,是體內核酸代
謝中的重要酶,在肝細胞損傷時,此酶早于 SGPT 釋放于
血清中,并且升高明顯,其對鑒別肝細胞性黃疸及阻塞性
黃疸有明顯的測定意義,并且在缺氧過程中黃-嘌呤脫氫酶
很快形成黃-嘌呤氧化酶,其對自由基的產生起了重要作用。
二、測試原理:
XOD 可催化次黃-嘌呤生成黃-嘌呤,與此同時產生超
氧陰離子自由基,當有電子受體及顯色劑存在的情況下,
生成紫紅色結合物,根據后者生成量的多少可以推算出
XOD 的活力。
三、試劑組成與配制:(50 管/48 樣)
試劑一:液體 20mL×3 瓶,-20℃以下冷凍保存 3 個月,用
時根據需要量取出室溫融化或 37℃水浴融化。
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 個月。
試劑三:黃色液體 6mL×2 瓶, 4℃避光保存 3 個月。
試劑四:粉劑×2 支,稀釋液 0.6mL×2 支, -20℃以下冷凍
保存 6 個月,臨用前取 4 號稀釋液 0.6mL 稀釋 4
號粉劑一支,稀釋好的 4 號試劑-20℃以下冰箱或
冰室保存。盡量避免反復凍溶。(注:試劑四粉劑
本身量較少,可能會附著于管壁或蓋子內(并非空
管),可 4000 轉/分鐘離心 2 分鐘后再用稀釋液溶
解)
試劑五:終止液 60mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 個月。
四、操作步驟:
1、樣本前處理:
①、血清(漿):
血清可直接取樣進行檢測;血漿需以 3000~3500 轉/
分,離心 10 分鐘,小心吸取澄清的上清進行檢測。若仍
有混濁可反復離心;
②、紅細胞:
抗凝全血以 1000 轉/分,離心 10 分鐘,棄上層血清,
取下層紅細胞按 1︰49 的比例加雙蒸水制成溶血液待測。
配好的溶血液最好當天做檢測,4℃存放時間不超過 8 小
時;
③、組織:
準確稱取組織重量,按重量(g):體積(mL)=1:9 的比例
加入 9 倍體積的勻漿介質(推薦 0.86%或 0.9%的生理鹽
水 ), 冰 水 浴 條 件 下 , 機 械 勻 漿 , 制 備 成 10% 的 勻 漿
液,2500~3000 轉/分鐘,離心 10 分鐘,取上清液進行測定。
五、參考取樣量(a*):
血清 50~100μL;1︰49 溶血液 50μL;10%肝組織勻漿
20μL~100μL。
七、注意點:
1、試劑一、試劑四放-20℃保存,盡量避免反復凍溶,如要
多次使用,請在第一次解凍(或試劑四配好)后分裝好
再保存。
2、組織塊要用生理鹽水漂洗后,濾紙吸干,-20℃以下可保
存 3 個月以上。
3、血漿中 XOD 的檢測:血漿在檢測過程中易引起混濁,需
在測試前以 3000~3500 轉/分,離心 10 分鐘,小心吸取
澄清的上清,棄去上層脂肪與下層沉淀,若仍有混濁可
反復離心。
黃-嘌呤氧化酶(XOD)測定試劑盒