輔酶IINADP（H）含量測(cè)試盒

（規(guī)格:50T/24 樣 分光光度法）

一、測(cè)定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用使氧化型唾哇藍(lán) (MTT) 還原為甲，570nm下檢測(cè)吸光值，從而測(cè)定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP為NADPH，從而檢測(cè)NADP*含量。

二、儀器設(shè)備（自備）

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

三、試劑組成:(50T/24 樣)

酸性提取液:50mlx1 瓶，4C保存:

堿性提取液:50mlx 瓶，4C保存:

試劑一:液體15 mlx1 瓶，4C保存:

試劑二: 粉劑x1 支，-20C保存，用時(shí)加入4ml 蒸留水，混勻:用不完的試劑4C保存一周:試劑三:粉劑x1 支，-20C保存，用時(shí)加入4ml 蒸餾水，混勻:用不完的試劑4C保存一周試劑四:粉劑x1 支，4C保存，用時(shí)加入4ml 蒸餾水，混勻: 用不完的試劑4C保存一周:

試劑五;液體1.8mlx1 支，4 C保存:

試劑六:液體30mlx1 瓶，4 C保存:

試劑七:液體50mlx1 瓶，4 C保存

四、操作步驟

NADP+和NADPH的提取：

詳見試劑盒內(nèi)說明書關(guān)于樣本處理的說明。測(cè)定組織、細(xì)菌和細(xì)胞時(shí)需要測(cè)定蛋白濃度。可用本所的A045-2總蛋定測(cè)試盒(考馬斯亮藍(lán)法)或A045-3、A045-4總蛋白定量測(cè)試盒(BCA法)進(jìn)行蛋白濃度的測(cè)定。

輔酶IINADP（H）含量測(cè)試盒