溶-菌酶（LZM）測定試劑盒

（比濁法）

本所比濁法測定溶-菌酶活性方法主要有三種：

1、自身對照法（附錄 I）：適用于樣本數量較少，或者樣本有混濁或有顏色（如血液紅色、勻漿液濁度等）；

2、空白對照法（附錄 II）：適用于樣本量多且樣本比較澄清透明；

3、標準曲線法（附錄 III）：適用范圍同空白對照法。

一、測定原理：

在一定濃度的混濁菌液中，由于溶-菌酶能水解細菌細胞

壁上肽聚糖使細菌裂解而濃度降低，透光度增強，故可以根

據透光度變化來推測溶-菌酶的含量。

二、試劑組成及配制 (30T/28 樣)

1、試劑組成：

試劑一：菌粉，5mg×4 支，2～8℃干燥保存，有效期 6 個月。

試劑二：菌粉溶劑，100mL×1 瓶，2～8℃保存，并每月放

微波爐中溫消毒 20 秒，有效期 6 個月。

試劑三：標準品，粉劑 2mg×1 支（活力為 8 萬單位/mg），2～

8℃干燥保存，有效期 6 個月。

[注]：試劑盒嚴格按照上述方法保存有效期可延至一年。

2、試劑配制：

（1）、貯備菌液的配制：

取 5mg/支的菌粉 1 支，倒入勻漿管中，加菌粉

溶劑 1mL，輕輕緩慢上下旋轉研磨 3 分鐘（切勿濺

出），即為貯備菌液，將其取出后置 2～8℃冰箱密

封保存一周左右。

（2）、應用菌液的配制：

按貯備菌液:菌粉溶劑=1:19 進行配制，需多少配

多少。剩下的應用菌液 2～8℃可保存一周左右。最

好是現用現配，用時搖勻。

（3）、標準品的配制：

①、標準品貯備液的配制：

每支準確加雙蒸水 1.0mL 配成 2mg/mL 的標準品

貯備液。2～8℃可保存 7～10 天。

②、標準品應用液的配制：

臨用時按標準品貯備液∶雙蒸水=1∶799 比例稀

釋成 2.5µg/mL（即 200U/mL）的標準品應用液，需多

少配多少。2～8℃保存，可保存 7～10 天。

附錄Ⅰ：自身對照法測定溶-菌酶

（適用于樣本數量較少，或者樣本有混濁或有顏色，如血液紅

色、組織勻漿等）

[注]：本法用分光光度計 530nm 處,1cm 光徑比色皿測得必須是

透光度值。

1、操作步驟

①、將配制好的應用菌液，標準應用液及所需檢測的樣本均

放入 37℃水浴箱中預溫 5 分鐘以上。使菌液，標準液

及檢測樣本的溫度達到 37℃。

②、將可見分光光度計于 530nm 處,1cm 光徑比色皿,以雙蒸

水調透光度 100% (比色皿準備兩只,一只用于調透光度

100%,一只用于測定)。

③、往相應編號的試管中加入 0.2mL 待測樣本，取 2mL 應

用菌液迅速沖入試管中，立即混勻并計時。(標準品應

用液取 0.2mL,加入 2mL 應用菌液,其它操作與測定相同)

④、迅速倒入比色皿中在可見分光光度計 530nm 處比濁，

15 秒時讀取透光度值 T0, 比色皿不要取出，在 2 分 15

秒時讀取透光度值 T2；

⑤、求出 2 次透光度的差值（△T= T2-T0）。

[注 1]：用同一比色皿每檢測一個樣本后均要用雙蒸水沖洗

干凈，才可再放第二個樣本或標準品應用液。

[注 2]：當測定管△T 大于 15 時，請將樣本稀釋后再測。

溶-菌酶（LZM）測定試劑盒