H+K+ -ATP 酶活力測試盒 檢測服務
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H+K+ -ATP 酶活力測試盒,ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,測定無機磷的量可判斷 ATP 酶活力的高低。
H+K+ -ATP 酶活力測試盒
二、樣本前處理
準確稱取胃粘膜組織重量,按重量(g):體積(mL)=1:9
的比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下制備成 10%
的組織勻漿液,2500 轉/分,離心 10 分鐘,取上清液,再用生
理鹽水 5 倍稀釋成 2%的濃度待測。
六、測試原理:
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,測定無機磷
的量可判斷 ATP 酶活力的高低。H +K + -ATP 酶是一種能被
鉀專一激活而不被烏本苷抑制的 ATP 酶。
七、注意事項:
1、具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管要
求嚴格,要沒有一點磷,若試管放過磷酸或磷酸緩沖液,
一定要洗得非常干凈,即先用洗潔精加水煮,再用自來
水沖,最后用雙蒸水沖干凈。最好用一次性塑料管或新
玻璃管,避免磷污染是檢測成敗的關鍵。
2、定磷劑配好后,不可放置太久,一般保存 1~5 天,最好
現用現配。隨時放冰箱。
3、最好采用先配 A、B 兩種混合液,然后按簡化操作步驟
檢測。這樣快捷、準確。
4、所有配試劑的器皿均要專用,包括吸硫酸的吸管及盛水
的器皿。
八、測定意義:
H +K + -ATPase 對胃酸的分泌及胃的消化功能具有重要
的生理意義,70 年代 Forte 等人首先在牛蛙的胃粘膜上分
離出一類能被 K +專一激活而不被烏本苷抑制的 ATPase 即
H +K + -ATPase,隨后 Lee·j 等人又證明了含有該酶的膜囊泡
運動跨膜運輸質子的作用,從而為胃酸分泌的機理奠定了
分子學基礎,H +K + -ATPase 定位于胃粘膜壁細胞(Parietal
lell)上,屬于第二類質子泵,它通過自身的磷酸化(E1→E2)
與去磷酸化(E2→E1)完成的 H + /K +電中性(electroneutral)
跨膜離子轉運,不斷將壁細胞內的質子運輸到膜外行使泌
酸的功能。
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