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GST-瓊脂糖凝膠FF

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GST-瓊脂糖凝膠FF
英文名稱:GST- Berpharose FF
貨號:B2821
規(guī)格:1ml
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

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GST-瓊脂糖凝膠FF


英文名稱:GST- Berpharose FF


貨號:B2821


規(guī)格:1ml


1.產(chǎn)品介紹


GST-瓊脂糖凝膠FF是一種將谷胱-甘肽鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),與生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高、非特異性吸附少、流速快等特點(diǎn),主要用于谷胱-甘肽轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記蛋白(GST融合蛋白)、谷胱-甘肽轉(zhuǎn)移酶和谷胱-甘肽依賴蛋白的分離純化。


2.規(guī)格


1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、20ml、100ml、500ml 使用方法:


①推薦緩沖液:


平衡緩沖液:10 mM PBS(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3)。


洗脫緩沖液:50 mM Tris-HCl, 10 mM還原型谷胱-甘肽(GSH), pH 8.0


②平衡


用平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)不變。


③上樣


切換轉(zhuǎn)換閥進(jìn)行上樣,上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可進(jìn)行線性實(shí)驗(yàn)找到上樣量。樣品的預(yù)處理:置換緩沖液,澄清過濾(0.45μm、0.22μm)等。


④沖洗


用2~3個(gè)柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導(dǎo)率、pH等參數(shù)不變。此時(shí)未交換的組分將被清洗出去。


⑤洗脫


一般推薦用10 mM還原型谷胱-甘肽溶液(可含緩沖成分)進(jìn)行洗脫。


⑥再生


用蒸餾水按操作流速?zèng)_洗3~5個(gè)柱體積,接著用平衡液洗到平衡3~5個(gè)柱體積。再生時(shí)若有失活的蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉,可用在位清洗(CIP)法除去。


⑦在位清洗(CIP)


去除沉淀和變性蛋白:用2個(gè)柱體積的6 M鹽酸胍清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5個(gè)柱體積。去除強(qiáng)疏水蛋白:用3~4個(gè)柱體積的70%乙醇清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5個(gè)柱體積。


6.注意事項(xiàng):


1)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。


2)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4~8℃。


3) 2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸。


4)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。


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