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乙酰膽堿酯酶（A-CHE）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：乙酰膽堿酯酶( AcetyL choline esterase)水解乙酰膽堿生成膽堿及乙酸,膽堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB(對(duì)稱三硝基苯,Sym- Trinitrobenzene)黃色化合物,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可反應(yīng)膽堿酯酶的活力。

乙酰膽堿酯酶，簡(jiǎn)稱AchE，是生物神經(jīng)傳導(dǎo)中的一種關(guān)鍵性酶，在膽堿能突觸間，該酶能降解乙酰膽堿，終止神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)突觸后膜的興奮作用，保證神經(jīng)信號(hào)在生物體內(nèi)的正常傳遞。  具有羧肽酶和氨肽酶的活性。乙酰膽堿酯酶參與細(xì)胞的發(fā)育和成熟，能促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)育和神經(jīng)再生。

乙酰膽堿酯酶即真性膽堿脂酶主要來(lái)自胎兒的興奮性細(xì)胞，反應(yīng)神經(jīng)系統(tǒng)成熟度。胎兒神經(jīng)管閉合缺損（如開(kāi)放性脊柱裂）及開(kāi)放性腹壁缺陷時(shí)，羊水中假性膽堿酯酶增加（PchE）。兩者可通過(guò)同時(shí)測(cè)定羊水中PCHE活性并算出羊水ACHE/PchE比值來(lái)區(qū)分，具有很高的科研意義。
乙酰膽堿酯酶（Acetylcholinesterase）水解乙酰膽堿生成膽堿及乙酸，膽堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB（對(duì)稱三硝基苯，Sym-Trinitrobenzene）黃色化合物，根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量，水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可反應(yīng)膽堿酯酶的活力。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約30分鐘，可測(cè)60例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
3、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.5%。
4、回收試驗(yàn)： X =97%。
5、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織，效果均佳。

所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為412nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、漩渦混勻器
4、微量移液器

樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。

操作流程：
1、按步驟加入樣本和R2、R3
2、漩渦混勻，37℃孵育6分鐘
3、加入R4、R5、R6，室溫靜置15分鐘
4、412nm波長(zhǎng)，0.5cm光徑，比色

乙酰膽堿酯酶（A-CHE）實(shí)驗(yàn)代測(cè)