果膠酶測試盒 生化試劑
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果膠酶測試盒,水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應生成紅棕色物質,在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
果膠酶測試盒
(Pectinase Kit DNS 顯色法)
一、測定原理:
果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,
與DNS試劑反應生成紅棕色物質,在540nm有特征吸收峰,
測定540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
二、測定意義:
果膠酶(pectinase)是一類分解果膠質酶類的總稱,包
括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶
四大類,廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、
釀酒、環保、醫藥、紡織及日化用品行業。
三、自備儀器或用品:
天平、恒溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿
(光徑1cm)、恒溫水浴鍋。
四、試劑盒組成(50T/24 樣):
提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前加入12.5mL試劑一,
50°加熱溶解,保存一周。
試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃避光保存。
五、粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的
比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進
行冰浴勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清,置冰
上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數量(10 4個):提取液體積(ml)
為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取
液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300W,超聲3秒,
間隔7秒,總時間3分鐘);然后10000g,4℃離心10
分鐘,取上清置于冰上待測。
3. 細胞培養液:直接檢測。
八、注意事項:
1. 試劑一若有沉淀析出,請置于50℃加熱溶解。
2. 測定之前請先做預實驗,如果吸光值較高或較低,請用提
取液做適當的稀釋或者加大樣本量,并在計算公式中乘以
稀釋倍數或者以實際加入的樣本體積參與計算。
3. 煮沸樣本建議在沸水中煮沸10分鐘,以將酶滅活。
果膠酶測試盒