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果膠酶測試盒 生化試劑

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果膠酶測試盒,水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應生成紅棕色物質,在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性。

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果膠酶測試盒

Pectinase Kit DNS 顯色法)

一、測定原理:

果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,

DNS試劑反應生成紅棕色物質,在540nm有特征吸收峰,

測定540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性。

二、測定意義:

果膠酶(pectinase)是一類分解果膠質酶類的總稱,包

括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶

四大類,廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、

釀酒、環保、醫藥、紡織及日化用品行業。

三、自備儀器或用品:

天平、恒溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿

(光徑1cm)、恒溫水浴鍋。

四、試劑盒組成(50T/24 )

提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存。臨用前加入12.5mL試劑一,

50°加熱溶解,保存一周。

試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃避光保存。

五、粗酶液提取:

1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)1510

比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進

行冰浴勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清,置冰

上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(10 4個):提取液體積(ml

5001000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取

液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300W,超聲3秒,

間隔7秒,總時間3分鐘);然后10000g4℃離心10

分鐘,取上清置于冰上待測。

3. 細胞培養液:直接檢測。

八、注意事項:

1. 試劑一若有沉淀析出,請置于50℃加熱溶解。

2. 測定之前請先做預實驗,如果吸光值較高或較低,請用提

取液做適當的稀釋或者加大樣本量,并在計算公式中乘以

稀釋倍數或者以實際加入的樣本體積參與計算。

3. 煮沸樣本建議在沸水中煮沸10分鐘,以將酶滅活。

 果膠酶測試盒

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