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谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒 生化試劑

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谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒,二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應時能產生一種黃色化合物,可進行比色定量測定。

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谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒

(比色法)

一、測定原理:

二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應時能產生一種黃色化合物,可進行比色定量測定。

二、試劑組成與配制:(100T/96 樣)

試劑一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 個月。甲粉: 90100℃的熱雙蒸水 170ml

充分溶解;

試劑一應用液的配制:將已配好的甲液與乙液充分混合。此為過飽和溶液,室溫靜置冷卻后,如

有結晶,則取上清進行實驗,室溫保存 6 個月。

試劑二:粉劑×1 瓶,用時加雙蒸水至 200ml 溶解,用我所贈送的塑料瓶室溫保存 6 個月。

試劑三:粉劑×1 支,用時加雙蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 個月。

試劑四:粉劑×4 支,用時每支加雙蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。

試劑五:GSH 標準品粉劑 3.07mg×3 支,4℃保存 6 個月。

試劑六:GSH 標準品溶劑貯備液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 個月。

GSH 標準品溶劑應用液的配制: GSH 標準品溶劑貯備液:雙蒸水=1:9,加入 9 倍體積的雙

蒸水進行稀釋,現用現配。

1mmol/L GSH 標準品溶液的配制:GSH 的分子量為 307,每次測定前將 3.07mg GSH

準品加入到 10ml GSH 標準品溶劑應用液中,混勻,

現用現配。

20μmol/L GSH 標準品溶液的配制: 1mmol/LGSH 標準品溶液 0.2ml 加入 GSH 標準品溶

劑應用液 9.8ml, 現用現配。

四、注意事項

1、血液中的 GSH 幾乎全部存在于紅細胞內,可以用每升全血中 GSH 的克數來表示,也可用

每克 Hb GSH 的含量來表示。

2、計算時應用消光系數,故比色計要校正波長。用標準管計算較方便、準確。

3、吸取上清時,最好用帶刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避開表面的一層薄膜,插到上清

液中吸取 2ml 做顯色反應。

4、最好每批試驗做 2 個標準管、空白管,以減少操作誤差。

五、測定意義:

谷-胱甘肽(GSH)是一種低分子清除劑,它可清除 O2 -H2O2LOOH。谷-胱甘肽是谷

氨酸、甘-氨酸和半胱-氨酸組成的一種三肽,是組織中主要的非蛋白質的巰基化合物,并且是

GSH—PX GST 兩種酶類的底物,為這二種酶分解氫過氧化物所必需,它并且能穩定含巰

基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷,最近還證明 GSH 也參與使維生素 E 恢復

到還原態的作用,缺乏或耗竭 GSH 會促使許多化學物質或環境因素產生中毒作用或加重其

中毒作用,這可能與增加氧化損傷有關,因而 GSH 的量的多少是衡量機體抗氧化能力大小

的重要因素。

 谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒

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