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琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒 生化試劑

  • 型   號(hào):
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琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒,催化底物反應(yīng),F(xiàn)AD 是該反應(yīng)的輔基,F(xiàn)AD 被還原成 FADH,該反應(yīng)與 2,6- DPIP的還原相偶聯(lián),測定 2,6-DPIP 的還原速度可以推算出SDH 的活力。

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琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒

50T/48 樣)

一、測定原理:

琥珀酸脫氫酶(SDH)催化底物反應(yīng),FAD 是該

反應(yīng)的輔基,FAD 被還原成 FADH,該反應(yīng)與 2,6- DPIP

的還原相偶聯(lián),測定 2,6-DPIP 的還原速度可以推算出

SDH 的活力。

二、試劑組成與配制:(50T/48 樣)

試劑一:液體 60mL×2 瓶,4℃冷藏 3 個(gè)月;

試劑二:液體 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;

試劑三:液體 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;

試劑四:液體 6mL×2 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;

試劑五:液體 6mL×1 瓶,避光-20℃冷藏 3 個(gè)月,如需分

多次使用,建議老師將試劑五分裝后冷凍保存,

避免多次的反復(fù)凍融;

試劑六:液體 6mL×1 瓶,4℃冷藏 3 個(gè)月。

工作液的配制:試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:試劑五:

劑六=2 : 0.1 : 0.1 : 0.2 : 0.1 : 0.1 的比例進(jìn)行配

,用多少配多少,現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后一定要避光

三、操作步驟:

a、將可見分光光度計(jì) 600nm ,1cm 光徑比色皿,以雙蒸

水調(diào)零 (比色皿準(zhǔn)備兩只,一只用于調(diào)零,一只用于測

)

b、將工作液37℃預(yù)溫 5 分鐘以上。

c往相應(yīng)編號(hào)的試管中加入 100μL 待測樣本,用 5mL

液器吸取 2.6mL 工作液迅速?zèng)_入試管中,立即混勻并

計(jì)時(shí)。

d迅速倒入比色皿中在可見分光光度計(jì) 600nm 處比色,5

秒時(shí)讀取吸光度值(A1值), 1 5 秒時(shí)再次測定吸

光度值(A2 值);

e求出 2 次吸光度差值(A=A1-A2)。

注意點(diǎn):

①、工作液一定要避光保存,測定過程中工作液同樣要

避光;

②、比色皿必須用自來水沖洗干凈,再用雙蒸水洗 2

3 次后,才能對(duì)下一個(gè)樣本進(jìn)行檢測;

③、在比色皿中加完樣后,下一步加試劑與按秒表需

同步;

④、在比色皿中加完試劑后,必須快速放入分光光度

計(jì)的比色槽中;

⑤、試劑二、試劑三、試劑四、試劑五必須避光冷藏;

⑥、配好的混合試劑在測定前必須預(yù)溫。

 琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒

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