琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒 生化試劑
- 型 號(hào):
- 參考價(jià):0~0
琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒,催化底物反應(yīng),F(xiàn)AD 是該反應(yīng)的輔基,F(xiàn)AD 被還原成 FADH,該反應(yīng)與 2,6- DPIP的還原相偶聯(lián),測定 2,6-DPIP 的還原速度可以推算出SDH 的活力。
琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒
(50T/48 樣)
一、測定原理:
琥珀酸脫氫酶(SDH)催化底物反應(yīng),FAD 是該
反應(yīng)的輔基,FAD 被還原成 FADH,該反應(yīng)與 2,6- DPIP
的還原相偶聯(lián),測定 2,6-DPIP 的還原速度可以推算出
SDH 的活力。
二、試劑組成與配制:(50T/48 樣)
試劑一:液體 60mL×2 瓶,4℃冷藏 3 個(gè)月;
試劑二:液體 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;
試劑三:液體 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;
試劑四:液體 6mL×2 瓶,避光 4℃冷藏 3 個(gè)月;
試劑五:液體 6mL×1 瓶,避光-20℃冷藏 3 個(gè)月,如需分
多次使用,建議老師將試劑五分裝后冷凍保存,
避免多次的反復(fù)凍融;
試劑六:液體 6mL×1 瓶,4℃冷藏 3 個(gè)月。
工作液的配制:按試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:試劑五:試
劑六=2 : 0.1 : 0.1 : 0.2 : 0.1 : 0.1 的比例進(jìn)行配
制,用多少配多少,現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后一定要避光。
三、操作步驟:
a、將可見分光光度計(jì)于 600nm 處,1cm 光徑比色皿,以雙蒸
水調(diào)零 (比色皿準(zhǔn)備兩只,一只用于調(diào)零,一只用于測
定)。
b、將工作液,37℃預(yù)溫 5 分鐘以上。
c、往相應(yīng)編號(hào)的試管中加入 100μL 待測樣本,用 5mL 移
液器吸取 2.6mL 工作液迅速?zèng)_入試管中,立即混勻并
計(jì)時(shí)。
d、迅速倒入比色皿中在可見分光光度計(jì) 600nm 處比色,5
秒時(shí)讀取吸光度值(A1值),在 1 分 5 秒時(shí)再次測定吸
光度值(A2 值);
e、求出 2 次吸光度差值(△A=A1-A2)。
注意點(diǎn):
①、工作液一定要避光保存,測定過程中工作液同樣要
避光;
②、比色皿必須用自來水沖洗干凈,再用雙蒸水洗 2~
3 次后,才能對(duì)下一個(gè)樣本進(jìn)行檢測;
③、在比色皿中加完樣后,下一步加試劑與按秒表需
同步;
④、在比色皿中加完試劑后,必須快速放入分光光度
計(jì)的比色槽中;
⑤、試劑二、試劑三、試劑四、試劑五必須避光冷藏;
⑥、配好的混合試劑在測定前必須預(yù)溫。
琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒