上海信帆提供促激素（TSH）放免實驗代測服務
更新時間：2021-02-24 點擊次數：807次上海信帆提供促激素（TSH）放免實驗代測服務
通用名：碘[125I]人促激素放射免疫分析藥盒
漢語拼音：Dian [125I] Rencujiazhuangxianjisu Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名：Iodine [125I] Human Thyroid Stimulating Hormone Radioimmunoassay Kit
[使用目的]
用于人血清樣本中促激素(TSH)的定量測定
[試驗原理]
促激素（TSH）是含211 個氨基酸的糖蛋白類激素，分子量約為28,000D，由α
和β兩個亞基組成。TSH 主要受下丘腦分泌的促激素釋放激素（TRH）和血液中游離
的激素（T3、T4）的調節。TRH 可促進TSH 的分泌，T3、T4 對TSH 的分泌起負反饋
調節作用。另外，下丘腦分泌的生長激素釋放抑制激素（SS）和腎上腺皮質分泌的糖皮質
激素可降低TSH 的分泌，而雌激素可增加其分泌。
本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理：含促激素(TSH)的樣
品和125I 標記的促激素(TSH)與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二
抗及PEG，使免疫復合物沉淀，離心，測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中促甲
狀腺激素(TSH)的濃度。
[試劑主要組成成分]
1.TSH 標準品：
一套共6 瓶，以不含TSH 的人血清為基質，用時輕輕搖勻，需冷存。
TSH 標準品濃度：
A B C D E F （單位）
0 1 5 10 25 50 μIU/mL
2.質控品：二瓶，1.0ml／瓶，-20℃凍存（2-8℃保存六周）。。
3.抗TSH 血清： 綠色溶液，需2-8℃冷存。
4.125I-TSH： 紅色溶液，需2-8℃冷存。
5.分離劑： 藍色溶液，充分搖勻后使用，需2-8℃冷存。
[儀器]
1、γ－計數器
2、低溫離心機
3、恒溫水浴箱
[樣本要求]
110 微升人血清樣本。
采靜脈血5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后，1500 轉／分離心，取其上清液，放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲存6 個月。
嚴重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
[實驗方法]
操作方法I：
1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少30 分鐘以上才可進行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重復；
3、取每個濃度的標準品、質控血清和樣本200μl 加入相應編號的試管中；
4、除T、NSB 管外，每管均各加入200μl 抗體工作液，充分混勻；
5、37℃溫育1.5 小時；
6、每管均各加入200μl 標記物工作液，充分混勻；
7、37℃溫育1 小時；
8、每管均各加入500μl 分離劑后，充分混勻；
9、離心3500 轉／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
10、用γ-計數器測定每管1 分鐘的放射性強度計數；
11、從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
操作方法Ⅰ (OperationⅠ)： （單位μL）
T
NSB 標準品質控品和人樣品
A（B0） B C D E F L H 1 2 3 …..
標準品(STD)
A 200 200
標準品(STD)
B－F 200 200 200 200 200
質控品和樣品200 200 200 200 200 ….
抗TSH 血清
混勻，置37℃水浴溫育90 分鐘
125I-TSH
混勻，置37℃水浴溫育60 分鐘
分離劑500
搖勻，3000RPM 離心20 分鐘（溫度低于25℃）
吸去上清液
沉淀物計數1 分鐘
操作方法II：
1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少30 分鐘以上才可進行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重復；
3、取每個濃度的標準品、質控血清和樣本200μl 加入相應編號的試管中；
4、每管均各加入200μl 標記物工作液；
200
200
5、除T、NSB 管外，每管均各加入200μl 抗體工作液，充分混勻；
6、室溫（20～25℃）放置12~16 小時；
7、每管均各加入500μl 分離劑后，充分混勻；
8、離心3500 轉／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
9、用γ-計數器測定每管1 分鐘的放射性強度計數；
10、從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
操作方法Ⅱ： （單位μL）
T
NSB 標準品質控品和人樣品
A（B0） B C D E F L H 1 2 3 …..
標準品(STD)
A 200 200
標準品(STD)
B－F 200 200 200 200 200
質控品和樣品200 200 200 200 200 ….
抗TSH 血清
125I-TSH
混勻,室溫放置12~16 小時
分離劑500
搖勻，3000RPM 離心20 分鐘（溫度低于25℃）
吸去上清液
沉淀物計數1 分鐘
[實驗過程中應注意]
1、γ-計數器本底計數應≤100CPM/分，效率應≥75％；
2、加入放射性標記物時，應做好防護、小心謹慎，以避免造成放射性污染；
3、如果某一個樣本的測定值高于濃度的標準品濃度，用零標準品以1：2 或1：
4 的比例稀釋樣本后重新測試，測試結果乘以相應的稀釋倍數。
[質量控制]
每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制，以確保每次實驗測定結果
的可靠性。
1、質控血清的平均值應在允許范圍內；
2、曲線方程應采用擬合方式；
3、重復樣本的測定結果相差在15％以內。
如不能同時滿足以上條件，則此次試驗結果無效，全部試驗需重新進行。
[測定結果的計算]
200
200
1、計算標準品（B~G）、質控品和樣品與標準品A 的比值（B/B0）;
2、劑量-反應曲線按“對數劑量-結合率對數”（Log(dose-Log(B/Bmax))數學模型或
四參數數學模型擬合，通過每個標準品的B/B0 和其濃度建立標準曲線；
3、從標準曲線上查出樣本的濃度值，B/B0 不在標準曲線之內的樣本及其濃度
[實驗的局限性]
1、本品僅供體外診斷使用，只能用于人血清樣本的測定而不能用于其他體液樣本；
2、通過其它方法得到的TSH 值與本品測定結果不具有直接的可比性；
[產品性能指標]
1、靈敏度：
取藥盒中校準試劑A 點（0 劑量）作10 平行管，求其均值X 及偏差SD，從劑量—反應
曲線上查出與X+2SD 相對應的劑量值，確定為本藥盒的靈敏度（小檢出值），為0.25
μIU/mL。
2、精密度：
精密度是質量控制的基本參數，用批內變異系數和批間變異系數確定。要求批內變異系
數< 10% ，批間變異系數< 15% 。
批內變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 同時分別進行多個復管一次測定中
的重復性，應小于10%。
C1 C2 C3
批內變異系數7.56% 5.34% 5.19%
批內變異系數均小于10%。
批間變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 在多次測定間的重復性，應小于15%。
C1 C2 C3
批間變異系數10.38% 9.35% 5.71%
批間變異系數均小于15%。
3、測定范圍：
采用零標準品添加高濃度的TSH,確定本試劑盒的測定范圍為0 ～ 50.0μIU/mL
[注意事項]
1、全部試劑應避光貯于2-8℃并在使用前應在室溫下（17-27℃）平衡。
2、該產品在制備過程中所用的血清均經檢測，他們對HBsAg、HIV 無反應。但即使這樣也
不會保證對所有的傳染性因素進行檢測。由于沒有一個明確的測試方法能*保證不會出現
HBsAg、HIV 或其他傳染病毒，所以所有的產品包括來自人體的物質都應按良好的實驗室規
B/B0×100 = 標準或樣品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 標準(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100
范，按疾病預防和控制中心的有關規定要求進行預防。
3、樣本濃度過高，在分析前用保溫液稀釋，結果乘以稀釋倍數。
4、血清正常值，僅供參考，使用單位應建立自己實驗室的正常值。
正常血清參考值0～10 μIU/mL
5、本藥盒標準品濃度用國家標準（衛生部生物制品檢定所提供標準80/558）標定需乘
以系數2.3
[規格] 100 人份／盒
[儲藏]冷凍組份-20℃,冷藏組份2～8℃。
[有效期] 1 個月
上海信帆提供促激素（TSH）放免實驗代測服務
