甲胎蛋白（AFP）放免試劑盒供應-上海信帆生物
更新時間：2020-11-25 點擊次數：959次甲胎蛋白(AFP)放免試劑盒供應-上海信帆生物
通用名：碘[125I]甲胎蛋白放射免疫分析藥盒
漢語拼音：Dian [125I] Jiataidanbai Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名：Iodine [125I] Alphafetoprotein Radioimmunoassay Kit
簡稱：碘[125I]- AFP 放免藥盒
[使用目的]
用于人血清樣本中甲胎蛋白(AFP)的定量測定
[試驗原理]
血清中甲胎蛋白（AFP）的檢測主要用于1、原發性肝細胞癌的診斷和監測。AFP 的測定
為原發性肝細胞癌的早期診斷和監測及肝癌流行病調查和理論研究提供了重要依據，是
用的腫瘤標志物之一。2.通過血清及羊水AFP 的檢測對先天性胎兒畸形的早期診斷
有實用價值。
本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理：含甲胎蛋白（AFP）的樣
品和125I 標記的甲胎蛋白（AFP）與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二
抗及PEG，使免疫復合物沉淀，離心，測沉淀放射性計數。通過標準曲線得到樣本中AFP
的濃度。
[試劑主要組成成分]
1. AFP 標準品：一套共7 瓶，以不含AFP 的人血清為基質，用時輕輕搖勻，2～8℃冷存。
AFP 標準品濃度
2.質控血清：三瓶，0.5 ml／瓶，2～8℃冷存。
3.抗AFP 血清： 藍色溶液，2～8℃冷存。
4.125I-AFP 標記物： 紅色溶液，2～8℃冷存。
5 分離劑：藍色溶液，充分搖勻后使用，2～8℃冷存。
[儀器]
1、γ－計數器
2、低溫離心機
3、恒溫水浴箱
[樣本要求]
110 微升人血清樣本。
采靜脈血5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后，1500 轉／分離心，取其上清液，放
A B C D E F G 單位
0 10 20 50 100 200 400 ng/mL
置玻璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲存6 個月。
嚴重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結果有影響。
[實驗方法]
1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少30 分鐘以上才可進行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重復；
3、取每個濃度的標準品、質控血清和樣本100μl 加入相應編號的試管中；
4、每管均各加入100μl 標記物工作液；
5、每管均各加入100μl 抗體工作液，充分混勻；
6、37℃溫育3 小時；
7、每管均各加入500μl 分離劑后，充分混勻；
8、室溫放置30 分鐘后，離心3500 轉／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
9、用γ-計數器測定每管1 分鐘的放射性強度計數；
10、從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
操作流程(Assay Procedure)
[實驗過程中應注意]
1、γ-計數器本底計數應≤100CPM/分，效率應≥75％；
2、加入放射性標記物時，應做好防護、小心謹慎，以避免造成放射性污染；
3、如果某一個樣本的測定值高于濃度的標準品濃度，用零標準品以1：2 或1：
4 的比例稀釋樣本后重新測試，測試結果乘以相應的稀釋倍數。
[質量控制]
每次實驗操作應至少采用兩個濃度的質控血清進行質量控制，以確保每次實驗測定結果
的可靠性。
1、質控血清的平均值應在允許范圍內；
2、曲線方程應采用擬合方式；
3、重復樣本的測定結果相差在15％以內。
如不能同時滿足以上條件，則此次試驗結果無效，全部試驗需重新進行。
[測定結果的計算]
1、計算標準品（B~G）、質控品和樣品與標準品A 的比值
2、劑量-反應曲線按“對數劑量-結合率對數”（Log(dose-Log(B/Bmax))數學模型或
四參數數學模型擬合，通過每個標準品的B/B0 和其濃度建立標準曲線；
3、從標準曲線上查出樣本的濃度值，B/B0 不在標準曲線之內的樣本及其濃度
[實驗的局限性]
1、本品僅供體外診斷使用，只能用于人血清樣本的測定而不能用于其他體液樣本；
2、通過其它方法得到的AFP 值與本品測定結果不具有直接的可比性；
[產品性能指標]
1、靈敏度：
取藥盒中校準試劑A 點（0 劑量）作20 平行管，求其均值X 及偏差SD，從劑量—反應
曲線上查出與X+2SD 相對應的劑量值，確定為本藥盒的靈敏度（小檢出值），為
1.28ng/mL。
2、精密度：
精密度是質量控制的基本參數，用批內變異系數和批間變異系數確定。要求批內變異系
數< 10% ，批間變異系數< 15% 。
B/B0×100 = 標準或樣品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 標準(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100
批內變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 同時分別進行多個復管一次測定中
的重復性，應小于10%。
C1 C2 C3
批內變異系數5.95% 6.43% 4.98%
批內變異系數均小于10%。
批間變異系數:指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 在多次測定間的重復性，應小于15%。
C1 C2 C3
批間變異系數7.27% 6.45% 4.51%
批間變異系數均小于15%。
3、測定范圍：
采用零標準品添加高濃度的AFP,確定本試劑盒的測定范圍為0～800 ng/ml
[注意事項]
1、全部試劑應避光貯于2-8℃并在使用前應在室溫下（17-27℃）平衡。
2、該產品在制備過程中所用的血清均經檢測，他們對HBsAg、HIV 無反應。但即使這樣也
不會保證對所有的傳染性因素進行檢測。由于沒有一個明確的測試方法能*保證不會出現
HBsAg、HIV 或其他傳染病毒，所以所有的產品包括來自人體的物質都應按良好的實驗室規
范，按疾病預防和控制中心的有關規定要求進行預防。
3、樣本濃度過高，在分析前用保溫液稀釋，結果乘以稀釋倍數。
4、血清正常值，僅供參考，使用單位應建立自己實驗室的正常值。
正常血清參考值＜20ng/ml
甲胎蛋白(AFP)放免試劑盒供應-上海信帆生物
