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感謝客戶訂購我司凝血酶

更新時間:2017-03-20   點擊次數(shù):829次

感謝客戶訂購我司凝血酶

凝血酶是一種絲氨酸蛋白酶,也是血液凝血級聯(lián)反應中的主要效應蛋白酶,顯現(xiàn)出促凝和抗凝的特性。

 

凝血酶是由在凝血酶原復合物中的非活性凝血酶原在Xa因子(FXa)因子的作用下通過蛋白裂解的方式產(chǎn)生【生理作用】當循環(huán)凝血因子在暴露的血管外組織與組織因子相接觸時,凝血酶會在組織上聚集。

 

凝血酶通過激活血小板,催化纖維蛋白原轉化為纖維蛋白,在血栓性疾病的引發(fā)和傳播上有著核心作用。

 

取纖維蛋白原約30mg,精密稱定,用0.9% 氯化鈉溶液1.5ml溶解,加凝血酶0.1ml(約3單位),快速搖勻,室溫放置約1小時至*凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產(chǎn)生渾濁,在105℃干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(%)。

 

然后用0.9%氯化鈉溶液制成含0.2%凝固物的纖維蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節(jié)pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液,備用。

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標準曲線的制備
取凝血酶標準品,用0.9%氯化鈉溶液分別制成每1ml中含5.0單位、6.4單位、8.0單位、10.0單位的標準品溶液。

 

另取內徑1cm、長10cm的試管4支,各精密加入纖維蛋白原溶液0.9ml,置37℃±0.5℃水浴中保溫5分鐘,再分別精密量取上述4種濃度的標準品溶液各0.1ml,迅速加入上述各試管中,立即計時、搖勻,置37℃±0.5℃水浴中,觀察纖維蛋白的初凝時間,每種濃度測5次,求平均值(5次測定之zui大值與zui小值的差不得超過平均值的10%,否則重測)。

 

標準品溶液的濃度應控制凝結時間在14~60秒為宜。在雙對數(shù)坐標紙上,以每管中標準品實際效價(單位)為橫坐標,凝結時間(秒) 為縱坐標,繪制標準曲線。


測定法
取本品3瓶,分別精密稱定其內容物的重量,每瓶按標示量分別加0.9%氯化鈉溶液制成與標準曲線濃度相當?shù)娜芤海芪?.1ml,按標準曲線的制備方法平行測定5次,求出凝結時間的平均值(誤差要求同標準曲線),在標準曲線上或用直線回歸方程求得效價(單位),按下式計算:

1圖冊
式中U為0.1ml供試品在標準曲線上讀得的實際效價(單位);
V為每瓶供試品溶解后的體積,ml;
10為0.1ml換算成1.0ml的數(shù)值;
W為每瓶供試品的重量,mg。
并計算出每瓶相當于標示量的百分數(shù)。

 

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