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DNA甲基化分析的完整解決方案

更新時(shí)間:2015-11-29   點(diǎn)擊次數(shù):2505次

Zymo于1994年成立于美國(guó)加州Orange County,主要研發(fā)和生物試劑表觀遺傳學(xué)系列產(chǎn)品和常用分子生物學(xué)試劑盒,其DNA甲基化,羥甲基化,核酸提取等產(chǎn)品已得到世界各*實(shí)驗(yàn)室的認(rèn)可,產(chǎn)品具有“快速、簡(jiǎn)便、超純”的特點(diǎn);
Zymo甲基化產(chǎn)品線已被上千次引用在各大主流學(xué)術(shù)刊物上,包括NATURE、SCIENCE 、PNAS、Stem Cells、 NucleicAcids Res等;迄今,EZ DNAMethylation™系列產(chǎn)品作為DNA重亞硫酸鹽處理(DNA甲基化分析前處理)的的金標(biāo)準(zhǔn),已成為zui和引用次數(shù)zui多的產(chǎn)品;


zui受好評(píng)的重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化試劑盒


產(chǎn)品 1 - EZ DNA Methylation™ Kits(轉(zhuǎn)化率>99%)

  • 該試劑盒已被Illumina, Sequenom, Nimblegen,Agilent,Roche等公司整合入其標(biāo)準(zhǔn)化工作流程中
品名規(guī)格貨號(hào)
EZ DNA Methylation™ Kit (柱子)Column, 50 Rxns, 200 RxnsD5001, D5002
EZ-96 DNA Methylation™ Kit (96孔板高通量)Shallow-Well, 2 x 96 Rxns
Deep-Well, 2 x 96 Rxns
D5003, D5004
EZ-96 DNA Methylation MagPrep (高通量磁珠法)4x96 rxns, 8x96 rxnsD5040, D5041


產(chǎn)品 2 - EZ DNA Methylation™-Gold Kits(轉(zhuǎn)化率>99%)

  • 該試劑盒是目前的重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化試劑盒,小于3小時(shí)轉(zhuǎn)化時(shí)間
品名規(guī)格貨號(hào)
EZ DNA Methylation-Gold™ Kit (柱子)50 Rxns, 200 RxnsD5005, D5006
EZ-96 DNA Methylation-Gold™ Kit (96孔板高通量)Shallow-Well, 2 x 96 Rxns
Deep-Well, 2 x 96 Rxns
D5007, D5008
EZ-96 DNA Methylation-Gold MagPrep (高通量磁珠法)4x96 rxns, 8x96 rxns.D5042, D5043

 
產(chǎn)品 3 - EZ DNA Methylation™-Direct Kits(轉(zhuǎn)化率>99.5%)

  • 該試劑盒可直接以細(xì)胞(≥10個(gè)細(xì)胞),血液和組織(FFPE)作為起始模板,并適合低樣本起始量(10個(gè)細(xì)胞 或 50pgDNA)
品名規(guī)格貨號(hào)
EZ DNA Methlyation-Direct™ Kit (柱子)50 Rxns, 200 RxnsD5020, D5021
EZ-96 DNA Methlyation-Direct™ Kit (96孔板高通量)Shallow-Well, 2 x 96 Rxns
Deep-Well, 2 x 96 Rxns
D5022, D5023
EZ-96 DNA Methylation-Direct MagPrep (高通量磁珠法)4x96 rxns, 8x96 rxns.D5044, D5045


產(chǎn)品 4 - EZ DNA Methylation™-Lightning Kits (轉(zhuǎn)化率>99.5%)

  • 該試劑盒可達(dá)zui快的1小時(shí)處理時(shí)間,*完成DNA的轉(zhuǎn)化
品名規(guī)格貨號(hào)
EZ DNA Methlyation-Lightning Kit(柱子)50 Rxns, 200 RxnsD5030, D5031
EZ-96 DNA Methylation-Lightning Kit(96孔板高通量)Shallow-Well, 2 x 96 Rxns
Deep-Well, 2 x 96 Rxns
D5032, D5033
EZ-96 DNA Methylation-Lightning MagPrep(高通量磁珠法)4x96 rxns, 8x96 rxns.D5046, D5047

 

圖注:經(jīng)重亞硫酸鹽處理后的DNA測(cè)序表明:位點(diǎn)5的甲基胞嘧啶保持不變,而未甲基化的胞嘧啶(如:位點(diǎn)7,9,11,14和15)在重亞硫酸鹽處理后被*轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,并在PCR擴(kuò)增后以胸腺嘧啶被檢測(cè)到。

產(chǎn)品 5 - EZ RNA Methylation Kit(轉(zhuǎn)化率>99%)

品名規(guī)格貨號(hào)
EZ RNA Methylation Kit50 prep, 200 prepR5001, R5002
  • 該產(chǎn)品為商品化的RNA重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化試劑盒
  • 配套Zymo Direct-zol™ RNA MiniPrep (Cat.No. R2050, R2052) 使用,效果杠杠的!
  • 轉(zhuǎn)化得到的RNA可用于RT-PCR, sequencing, library preparation and Next-Gen sequencing等

 

 DNA 標(biāo)準(zhǔn)品 定量 DNA 甲基化程度

Universal Methylated DNA Standards

  • 使用甲基化和未甲基化DNA對(duì)照,測(cè)定重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化效率
  • 與Zymo所有重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化產(chǎn)品兼容
品名規(guī)格貨號(hào)
Human Methylated & Non-Methylated DNA Set1 SetD5014
Human WGA Methylated & Non-Methylated DNA Set1 SetD5013
Universal Methylated Human DNA Standard20rxnsD5011
Universal Methylated Mouse DNA Standard20rxnsD5012

圖注:使用M.Sssl  甲基化酶測(cè)定的*甲基化。
來源于HCT116 DKO細(xì)胞的非甲基化和甲基化的DNA經(jīng)Mspl 和 Hpall 限制性內(nèi)切酶消化處理。Mspl可消化非甲基化和甲基化的DNA,而Hpall只能消化非甲基化DNA,無法消化CpG的甲基化。
 
5-mC & 5-hmC ELISA Kits - 靈敏的 5-mC  5-hmC 定量

  • 適用于基因組DNA中5-mC和5-hmC的高通量全局檢測(cè)
  • 整個(gè)工作流程zui快可在3小時(shí)內(nèi)完成
品名規(guī)格貨號(hào)
5-mC DNA ELISA Kit1 x 96 Preps
2 x 96 Preps
D5325
D5326
Quest 5-hmC™ DNA ELISA Kit1 x 96 Preps
2 x 96 Preps
D5425
D5426

圖注:5-mC DNA ELISA Kit可定量檢測(cè)來自于眾多樣本來源DNA中 5-mC程度(%),其結(jié)果與LC-MS檢測(cè)樣本結(jié)果密切關(guān)聯(lián)。
 

其他甲基化研究相關(guān)試劑

品名規(guī)格貨號(hào)
Anti-5-Methlycytosine Monoclonal Antibody 15 ul, 30 ul, 50 ul, 200 ul@ 1 ug/ul A3001-15,A3001-30,A3001-50,A3001-200
Anti-5 hmC Polyclonal Antibody25ug/25ul, 50ug/50ul, 200ug/200ulA4001-25, A4001-50, A4001-200
Methylated – DNA IP Kit10 RxnsD5101
OneStep qMethyl™ Kit44 testsD5310
OneStep qMethyl™ - Lite44testsD5311
Quest 5-hmC Detection Kit (includes Mspl GSRE)25 preps, 50 prepsD5410, D5411
Quest 5-hmC Detection-Lite Kit (GSRE not included)25 preps, 50 prepsD5415, D5416
Quest 5-hmC DNA Enrichment Kit25 rxns. 50 rxns.D5420, D5421
CpG Methylase (M.Sssl)200U, 400UE2010, E2011
CpG Methylase (M.CviPI)200U, 1000UE2014, E2015
5-hmC Glucosyltransferase100 units, 200 unitsE2026, E2027
ZymoTaq DNA Polymerase50 rxns. 200rxnsE2001, E2002
ZymoTaq PreMix50 rxns. 200rxnsE2003, E2004


更多甲基化系列產(chǎn)品請(qǐng)登錄www.zymoresearch。。com或咨詢吉泰生物
 

常見問題解答: 
Q:在用Zymo的重亞硫酸鹽試劑盒處理前,起始DNA樣本應(yīng)該儲(chǔ)存在TE,水,還是其他緩沖液中?
A:水和TE緩沖液均可用來儲(chǔ)存DNA,并且不會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)化過程造成干擾。
 
Q: 為什么使用EZ DNA Methylation-Direct Kit,我的DNA沒有得到*的轉(zhuǎn)化?
A: 1) 如果是固體樣本,很可能是處理的樣本量過大,而導(dǎo)致不*DNA轉(zhuǎn)化;
  2)如果是FFPE組織樣本,有可能是DNA已大規(guī)模受損以及/或者交聯(lián),導(dǎo)致不*轉(zhuǎn)化;
  3)如果在Proteinase K消化后,沒有通過離心去除碎片,則可能會(huì)干擾重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化過程,導(dǎo)致DNA的不*轉(zhuǎn)化;
 
Q:  為什么EZ-96 DNA Methylatioin 甲基化(96孔板)產(chǎn)品線有兩種不同的目錄號(hào)?
A:   這兩種不同的目錄號(hào)是用來區(qū)分試劑盒內(nèi)不同類型的96孔板。深孔板和淺孔板均適用于大多數(shù)離心機(jī)和微板架。如下闡釋了這兩類96孔板的區(qū)別:

 Silicon-AZymo-Spin I-96
款式淺孔深孔
尺寸(H x W x L)19 mm x 83 mm x 125 mm35 mm x 83 mm x 125 mm
結(jié)合/收集板組合高度43 mm60 mm
結(jié)合力/zui小洗脫體積5µg/30µl per well5µg/15µl per well
貨號(hào)D5003, D5007, D5022, D5032D5004,D5008, D5023, D5033


Q: Zymo 重亞硫酸鹽處理試劑盒與illumina技術(shù)平臺(tái)兼容嗎? 
A:  是的,Zymo的EZ DNA Methylation Kit技術(shù)被illumina使用在其GoldenGate和Infinium Assays平臺(tái)上;
 
Q: 用Zymo的EZ DNA Methylation Kit轉(zhuǎn)化得到的DNA可用作哪些下游分析應(yīng)用?
A:  用Zymo的任何一款EZ DNA Methylation kit轉(zhuǎn)化得到的DNA,可適用于后續(xù)的各類測(cè)序分析法,Ms-SNuPE, COBRA,  Bisulfite-PCR, MSP, Bisulfite-sequencing, mass spectroscopy (如: Sequenom的EpiTYPER), 以及其他分析方法。

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