大鼠補體片段3a(C3a)ELISA試劑盒購買和文章發表介紹
更新時間:2015-08-24 點擊次數:874次上海信帆生物科技公司憑借的生物技術和嚴格的質量管理體系,專業供應大鼠補體片段3a(C3a)ELISA試劑盒,雄厚的技術力量做基礎,專業團隊做后盾,對大鼠補體片段3a(C3a)ELISA試劑盒提供100%的率熱情的技術服務,為廣大客戶發表文章提供了便利的基礎。
為了建立穩定的大鼠部分肝移植(partial livertransplantation)動物模型的方法和手術技巧,為進一步的實驗提供能夠存活的穩定的部分肝移植動物模型。研究補體C3a活性片段早期干預同種大鼠部分肝移植后移植肝的病理表現、肝功能、增殖細胞核抗原標記指數(proliferating cell nuclear antigen labeling index,PCNA LI)和TNF-α、IL-6 mRNA表達變化,探討補體C3a活性片段對大鼠肝部分移植后早期肝再生的影響。
方法:1.采用Kamada“二袖套法",稍加改進建立大鼠原位60%肝移植動物模型,即供肝切除肝左葉及雙尾葉,采用端端連續縫合法吻合肝上下腔靜脈,用雙袖套法吻合門靜脈及肝下下腔靜脈,肝動脈結扎不予重建,膽管用內支架法完成膽道重建。術后觀察生存質量,總結手術技巧、經驗和方法,掌握成熟穩定的大鼠肝部分移植動物模型技術。2.采用上述方法建立Sprague-Dawley(SD)到SD補體C3a活性片段實驗組(A組)和SD到SD生理鹽水對照組(B組)部分肝移植動物模型。實驗組術后每6h腹腔注射補體C3a活性片段100ug,對照組給與等量的生理鹽水。每組正常存活大鼠24只,于術后12h、24h、48h和72h分別活殺6只取外周血漿及肝臟組織標本;光鏡觀察肝臟組織形態學改變;全自動生化分析儀檢測外周血漿ALT;免疫組織化學檢測PCNA、Real Time-PCR檢測TNF-α和IL-6 mRNA的表達。 結果:1.通過手術操作訓練,建立起穩定的大鼠部分肝移植實驗模型。A和B兩組間手術時間、供肝冷保存時間、受體無肝期時間相比較無顯著差異。2.血清ALT檢測:A、B組間相比較,A組血清ALT術后48h和72h分別為216.7±24.6U/L和143.4±18.7U/L;B組術后48h和72h血清ALT分別為466.6±32.8U/L和321.6±28.6U/L,兩組間差異有統計學意義(P<0.05);其余時間點比較無顯著性差異。3.肝細胞PCNALI的變化:兩組中PCNA LI的高峰均出現在術后48h,A組和B組的峰值分別為423.8±54.6和286.5±32.4;A組術后24h和48h的:PCNA LI分別為296.8±36.2和423.8±54.6,B組術后24h和48h的PCNA LI分別為172.4±28.5和286.5±32.4,A組術后24h和48h的PCNA LI均明顯高于B組術后同一時間點的PCNA LI,兩組間差異有統計學意義(P<0.05),而其余觀察時間點的PCNA LI則無顯著性差異。4.肝組織TNF-α和IL-6 mRNA表達的變化:A、B兩組TNF-α,和IL-6 mRNA表達的高峰均出現在術后第48h,術后72h出現下降趨勢。A組與B組在術后24h和48h比較差異均具有統計學意義(P<0.05)。
結論:1.大鼠部分肝移植術后早期應用補體C3a活性性片段可促進肝細胞的再生,降低血清ALT,起到保護肝功能的作用。2.大鼠部分肝移植術后早期應用補體C3a活性片段促進肝細胞再生可能通過上調大鼠部分肝移植術后TNF-α和IL-6 mRNA的表達發揮作用。