人外周血淋巴細胞分離液使用原理及操作！
更新時間：2021-12-03 點擊次數：5507次人外周血淋巴細胞分離液使用原理及操作！
人外周血淋巴細胞主要是指體內的淋巴細胞，主要包括T細胞和B細胞。外周血淋巴細胞能夠幫助人體抵御外來的細菌和病毒，能夠起到良好的免疫作用。人外周血淋巴細胞分離液（FICOLL配制）是一種用于分離人外周血淋巴細胞的無菌、低內毒素水平的密度梯度分離液。
產品名稱：人外周血淋巴細胞分離液（FICOLL配制）
產品規格：200ml
儲存條件：室溫，避光
產品指標：
密度 1.077±0.001g/mL
滲透壓 290~350mOsm/kgH2O
無菌 0.1μm 濾膜過濾
原理：根據血細 胞的密度差異（紅細胞和粒細胞密度為1.090g/mL左右；淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090g/mL；血小板為 1.030~1.035g/mL），通過離心使一定密度的細胞按相應密度梯度分布，從而將淋巴細胞從人外周血或臍帶血中分離出來。
實驗步驟（僅供參考）
1. 取新鮮抗凝全血（EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可）或者去纖維蛋白血液，用等體積的全血及組織稀釋液 或者PBS稀釋全血。
2. 在離心管中加入適量分離液，將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方，注意保持兩液面界面清晰。
3. 室溫，水平轉子500~1000g，離心20~30min （血液的體積越大所需的離心力越大，離心 時間越長，佳的分離條件需摸索，離心轉 速大不超過1200g）。
4. 離心后將出現明顯的分層：上層是稀釋的 血漿層，中間是透明的分離液層，血漿與分 離液之間的白膜層即為淋巴細胞層，離心管 底部是紅細胞與粒細胞。
5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心 管中， 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層 細胞。250g，離心10min。
6. 棄上清，5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞，250g，離心10min。
7. 重復上一步驟棄上清，細胞重懸備用
注：
本產品僅供科研實驗用，不做其它用途！
