ATP含量檢測試劑盒，三磷酸腺苷測試盒現貨供應
更新時間：2020-07-01 點擊次數：1071次ATP含量檢測試劑盒，三磷酸腺苷測試盒現貨供應
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三磷酸腺苷(adenosine 5-triphosphate,ATP)是生物體內能量轉換基本的載體,其含量的變化直接關系到各器官的能量代謝。ATP作為重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變,會影響許多細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態下,ATP水平會下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細胞可以上調細胞內ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發生狀態。ATP含量測定試劑盒可以用于檢測紅細胞或組織內的ATP水平。
ATP含量檢測試劑盒的樣本前處理:
1、紅細胞:抗凝全血取下層壓積紅細胞,一般按1:4的體積比加雙蒸水進行稀釋,再 混勻使溶血*,制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮10分鐘,取出混勻抽提1分鐘,4000轉/分鐘離心10分鐘,取上清液待測。
2、組織樣本:準確稱取組織稱重,按重量(g):體積(mL)=1：9的比例,加入9倍體積的沸雙蒸水,制成10%的勻漿液,再置于沸水浴中煮10分鐘,取出混勻抽提1分鐘,3500轉/分離心10分鐘,取上清液待測。
3、培養細胞:先離心處理將細胞與培養上清分離,除去培養上清,得到下層沉淀細胞(一般細胞數量達到106),將收集好的細胞加入300~500uL熱雙蒸水,置于熱水浴
(90-100°℃)中勻漿破碎,后將細胞懸液于沸水浴中加熱10分鐘,取出混勻抽提
1分鐘,即可用于測定(如果存在大塊細胞碎片,需離心后取上清測定)。
注:混勻抽提1分鐘即為漩渦混勻1分鐘。
注意事項:
1、此法具有微量、靈敏、快速的特點。對測定所用試管要求嚴格,要求不能有任何磷污染,建議使用全新一次性塑料試管,避免磷污染是檢測成敗的關鍵;
2、顯色應用液配好后,不可放置太久,一般可保存五天,好現用現配。隨時放冰箱
3、組織勻漿宜用2%~5%濃度的勻漿上清,若樣本濃度過高,則底色過深(對照管OD過高)需稀釋后再進行測定;一般通過做預試驗將對照OD值控制在1.0以下
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