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TTC法測(cè)種子生活力

更新時(shí)間:2019-05-17   點(diǎn)擊次數(shù):19167次

   凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過(guò)程中都有氧化還原反應(yīng),而無(wú)生活力的種胚則無(wú)此反應(yīng)。當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi),并作為氫受體被脫氫輔酶(NADH或NADPH)還原時(shí),可產(chǎn)生紅色的三苯基甲 (TTF),胚便染成紅色。當(dāng)種胚生活力下降時(shí),呼吸作用明顯減弱,脫氫酶的活性亦大大下降,胚的顏色變化不明顯,故可由染色的程度推知種子的生活力強(qiáng)弱。TTC還原反應(yīng)如下:NN+ NCl+NN+HCl(無(wú)TTFTTC色)(紅色)
【儀器與用具】
培養(yǎng)皿2套;鑷子1把;單面刀片1片;墊板(切種子用)1塊;燒杯1個(gè);棕色試劑瓶;解剖針1把;搪瓷盤1個(gè);pH試紙。
【試劑】
TTC溶液的配制:取1g TTC溶于1L蒸餾水或冷開(kāi)水中,配制成0.1%的TTC溶液。藥液pH應(yīng)在6.5~7.5,以pH試紙?jiān)囍ㄈ绮灰兹芙猓上燃由倭烤凭蛊淙芙夂笤偌铀?br />【方法】
1.將玉米、小麥等作物的新種子、陳種子或死種子,用溫水(30℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。
2.隨機(jī)取種子2份,每份50粒,沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi),取每粒種子的一半備用。
3.把切好的種子分別放在培養(yǎng)皿中,加TTC溶液,以浸沒(méi)種子為度。
4.放入30~35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40~60min.
5.保溫后,傾出藥液,用自來(lái)水沖洗2~3次,立即觀察種胚著色的情況,判斷種子有無(wú)生活力,把判斷結(jié)果記入表上。
【注意事項(xiàng)】
1.TTC溶液現(xiàn)配現(xiàn)用,如需貯藏則應(yīng)貯于棕色瓶中,放在陰涼黑暗處,如溶液變紅則不可再用。
2.染色溫度一般以25~35℃為宜。
3.判斷有生活力的種子應(yīng)具備:胚發(fā)育良好、完整、整個(gè)胚染成鮮紅色;子葉有小部分壞死,其部位不是胚中軸和子葉連接處;胚根尖雖有小部分壞死,但其它部位完好。 4.判斷無(wú)生活力的種子應(yīng)具備:胚全部或大部分不染色;胚根不染色部分不限于根尖;子葉不染色或喪失機(jī)能的組織超過(guò)1/2;胚染成很淡的紫紅色或淡灰紅色;子葉與胚中軸的連接處或在胚根上有壞死的部分;胚根受傷以及發(fā)育不良的未成熟的種子。
5.不同作物種子生活力的測(cè)定,所需試劑濃度、浸泡時(shí)間、染色時(shí)間不同。現(xiàn)將主要作物種子生活力測(cè)定所需條件列入表。
TTC法測(cè)定主要作物種子生活力要點(diǎn)
在35℃下
作 物 水 稻、高粱、玉米及麥類作物 棉花、蕎麥、蓖麻 花生 甜菜 大嘛向日葵 大豆 菜豆 亞麻 二葉草
種子準(zhǔn)備 去殼縱切 縱切 剝?nèi)シN皮 剝?nèi)シN皮 無(wú)須準(zhǔn)備
TTC濃度(%)
染色時(shí)間(h)0.1 0.1 1.0 0.1 1.02~3 0.5~1 2~3 3~4 3~4   
 
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