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凝血酶的正確使用方法您知道多少

上海信帆生物供應(yīng)的凝血酶為牛血或豬血中提取的凝血酶原，經(jīng)激活而得的無(wú)菌凍干制品。溶于水，10mg/ml。也可溶于0.1％BSA配成的100u/ml儲(chǔ)存液，-20℃保存。規(guī)格為：1700U/瓶  ！

凝血酶凍干粉

Thrombin from bovine plasma

【拼音名】Ningxuemei Dongganfen

【英文名】Thrombin from bovine plasma

【別名】凝血酵素；Factor IIa

【類別】?jī)H供凝血試劑、科研用途

【溶解性】溶于水，10mg/ml。也可溶于0.1％BSA配成的100u/ml儲(chǔ)存液，-20℃保存。
【規(guī)格】小包裝：1700U/瓶  

【貯藏】密封，-20°C以下貯存。

【性   狀】本品為白色、類白色或淺黃色凍干塊狀物或粉末。每1ml中含500單位的0.9%氯化鈉溶液可微顯渾濁

【產(chǎn)品介紹】

本品是從豬血或者牛血清中提取凝血酶原，經(jīng)激活、純化、超濾、凍干而得的無(wú)菌凍干品。

【檢  查】干燥失重取本品，精密稱定，置五氧化二磷干燥器中減壓干燥4小時(shí)，減失重量不得過(guò)3.0%

【無(wú)菌檢測(cè)】 取本品，分別加0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液5ml溶解后，依法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。

效價(jià)測(cè)定：

纖維蛋白原溶液的制備

取纖維蛋白原約30mg，精密稱定，用0.9%氯化鈉溶液1.5ml溶解，加凝血酶溶液0.1ml（約3單位），快速搖勻，室溫放置約1小時(shí)至*凝固，取出凝固物，用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產(chǎn)生渾濁，在105°C干燥3小時(shí)，稱取重量，計(jì)算纖維蛋白原中含凝固物的含量（%）。然后用0.9%氯化鈉溶液制成含0.2%凝固物的纖維蛋白原溶液，用0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7.0~7.4，再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液，備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取凝血酶標(biāo)準(zhǔn)品，用0.9%氯化鈉溶液分別制成每1ml中含5.0單位、6.4單位、8.0單位、10.0單位的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。另取內(nèi)徑1cm、長(zhǎng)10cm的試管4支，各精密加入纖維蛋白原溶液0.9ml，置37°c±0.5°c水浴中保溫5分鐘,再分別精密量取上述4種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液各0.1ml,迅速加入上述各試管中,搖勻,立即計(jì)時(shí),置37°c±0.5°c水浴中，觀察纖維蛋白的初凝時(shí)間，每種濃度測(cè)五次，求平均值(5次測(cè)定中大值與小值的差不得超過(guò)平均值的10%,否則重測(cè))。標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度應(yīng)控制凝結(jié)時(shí)間在14~60秒為宜。在雙對(duì)數(shù)坐 標(biāo)線紙上，以標(biāo)準(zhǔn)品效價(jià)(單位)為橫坐標(biāo)，凝結(jié)時(shí)間(秒)為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程。

測(cè)定法

　　取本品3瓶，分別精密稱定其內(nèi)容物的重量，每瓶按標(biāo)準(zhǔn)量分別加0.9%氯化鈉溶液制成與標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度相當(dāng)?shù)娜芤海芪?.1ml，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法平行測(cè)定5次，求出凝結(jié)時(shí)間的平均值（誤差要求同標(biāo)準(zhǔn)曲線），用回歸方程求得效價(jià)（單位），按下式計(jì)算：凝血酶效價(jià)（單位/毫克）=Ux10xV/W ,凝血酶效價(jià)（單位/瓶）=Ux10xv 式中 U為0.1ml供試品在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀得的實(shí)際效價(jià)（單位）； V為每瓶供試品溶解后的體積，ml； W為每瓶供試品的重量，mg。 并計(jì)算出每瓶相當(dāng)于標(biāo)示量的百分?jǐn)?shù)。

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