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明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項
更新時間:2018-08-01 點擊次數:1173次明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項
上海信帆生物推出明膠酶譜分析試劑盒,檢測基質金屬蛋白酶MMP2,MMP9活性,操作方便簡單,可以檢測細胞樣本,細胞培養上清樣本,全血樣本等,質量穩定!
操作注意事項:
1.制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。
2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6,復性的TRITON時間長了會有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培養箱中,因為會改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。
6.細胞樣本用PBS 5倍體積震蕩裂解,估算細胞的體積,然后加入5倍體積的PBS,渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心.或者手動震蕩。
明膠酶譜分析試劑盒采用酶譜法(zymography)檢測 MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法,其靈敏度可達 1 nM,高于 ELISA 方法,而且可檢測幾百個樣本。
明膠酶譜分析試劑盒使用注意事項