信帆生物教你處理人類樣本
更新時間：2016-12-21 點擊次數：1072次很多科研工作者都會使用人類樣本進行科學研究，樣本因獲取不易而珍貴無比。珍惜人類樣本，需從樣本處理開始。以下的一些樣本處理技巧，或許可以幫助您，消除實驗中的干擾物質。
一：多次磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌
磷酸鹽緩沖液（PBS）幾乎深得所分子生物學家的喜愛，因為PBS通常不會裂解或損壞細胞，同時允許重復洗滌。
如何使用：如果你想要的組織被覆蓋在血液中，用30-40mL冷PBS洗滌并輕輕搖動。將剩余的大部分組織轉移到新的EP管中，用于后續洗滌（每次洗滌都將增加細胞得產量）。幾次洗滌后，的組織將沒有血液和基質細胞。如果您想捕獲非粘連組織或細胞，請記住保存并離心用于洗滌的每個PBS管。
注意：使用PBS洗滌zui適用于上皮細胞的分離。洗滌也可以用來溫和地去除粘附在您感興趣的組織上的基質細胞。
二：通過預包被板分離目標細胞
不同的細胞對胞外基質蛋白或類似化合物具有不同的親和力。由于不同的粘附力，您可以快速，輕松將細胞系和預包被板共孵育，去除未結合細胞，從而分離目標細胞。膠原蛋白（用于上皮細胞）或多聚賴氨酸（用于多種細胞類型）就是很好的預包被材料。
注意：您需要事先評估目標細胞是否與底物相互作用（例如，一些細胞系能優先附著多聚賴氨酸，因為它們產生指向多聚賴氨酸的蛋白酶）。
三：利用特異性染色檢查細胞純度
您可以使用高度特異性標記物，如上皮細胞標記物—E-鈣粘蛋白或其他細胞類型來檢查細胞純度。一旦細胞群以上述方式大規模純化后，再通過常規染色方法驗證小的亞群。您可以通過顯微鏡或使用可用肉眼看到的顯色底物來觀察情況。
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