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上海信帆生物:蛋白質電泳-在蛋白質組學中的應用

更新時間:2016-04-27   點擊次數:1144次

原 理 
蛋白質分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及側鏈的游離基團而成為帶電顆粒,并可在電場內移動,其移動方向取決于蛋白質分子所帶靜電荷。不同蛋白質分子根據其氨基酸組成及所在溶液的pH值,攜帶的靜電荷不盡相同,致使它們在電場中的遷移率各異,從而達到分理的目的。
電泳原理示意圖

在蛋白質組學中對電泳的分類

一維電泳(one dimensional gel electrophoresis, 1DE),現在普遍采用垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)
二維電泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2DE),又稱雙向電泳

一維電泳
現在普遍采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE),包括非變性電泳(native PAGE)和SDS-PAGE兩種,前者主要是在分離蛋白復合物時經常用到。后者是在凝膠與緩沖系統中加入陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS),蛋白質分子被大量SDS陰離子包裹,消除了它們間原來攜帶的電荷差別,因而其遷移率僅反映蛋白質分子大小,故廣泛用于蛋白質分子量的測定。
凝膠濃度和蛋白質分離范圍

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