大鼠環磷酸腺苷（cAMP） ELISA試劑盒實驗總結和經驗
更新時間：2015-08-27 點擊次數：1207次 采用酵母致熱大鼠制作大鼠發熱動物模型,以復方阿司匹林作為陽性對照藥,通過觀察疏解退熱湯對大鼠模型的一般情況、用免疫生化法檢測大鼠下丘腦內側視前區和正中視前區PGE2、cAMP的含量進一步探討本方治療小兒外感發熱的退熱療效及其機理,來證明其組方的合理性,以進一步指導應用。
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方法:本實驗分為兩大部分。均選取健康雄性Wistar大鼠,體重約180-200g。(1)對酵母所致發熱大鼠體溫的影響:先將大鼠實驗室內適應3天,可自由進食水,每天測體溫2次。實驗時同法測體溫3次,每次間隔半小時,剔除體溫波動超過0.3℃的大鼠,取3次體溫的平均值作為基礎體溫。將大鼠隨機分成5組,除正常組外,其余4組均于大鼠背部皮下注射20%酵母混懸液10ml/kg。注射酵母8小時后選擇體溫上升0.8℃以上者,隨機分為模型組、疏解退熱湯高劑量組(簡稱高劑量組)、疏解退熱湯低劑量組(簡稱低劑量組)及復方阿司匹林組(簡稱A.P.C組),每組10只。以上各組用灌胃法給藥1次,給藥容量為10ml/kg,正常組及模型組給予等量蒸餾水。從給藥后1h、2h、3h、4h分別測量體溫1次。(2)對酵母所致發熱大鼠下丘腦組織中前列腺素E2(PGE2)、環磷酸腺苷(cAMP)含量的影響:制備發熱大鼠模型同前。每組20只大鼠。以上各組用灌胃法給藥1次,給藥容量為10ml/kg,正常組及模型組給予蒸餾水,高劑量組給予疏解退熱湯(2.1g/kg),低劑量組給予疏解退熱湯(1.1g/kg),A.P.C組給予復方阿司匹林(0.1g/kg)。分別于給藥后2h、4h測量體溫,然后快速斷頭取腦(1分鐘內取出),取出下丘腦,測定前列腺素E2(PGE2)、環磷酸腺苷(cAMP)含量,用ELISA試劑盒嚴格按照試劑盒操作說明書進行,并將各組的體溫值分別與含量進行相關分析。
結果:⑴對酵母致熱大鼠體溫的影響:在注射酵母8h后,與正常組相比,模型組、高劑量組、低劑量組及A.P.C大鼠的體溫均明顯升高(P0.05),而與低劑量、A.P.C組相比,差異均有統計學意義(P$lt;$0.05)。將給藥后2h、4h正常組、模型組、高劑量組的體溫值分別與相應PGE2、cAMP含量進行相關分析,結果表明二者之間均存在明顯正相關(P$lt;$0.01)。結論:疏解退熱湯能顯著抑制酵母混懸液誘導的大鼠發熱,說明本方有解熱作用,其機理可能是通過某種途徑減少中樞發熱介質的含量來發揮解熱作用的。
