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明膠酶譜法實驗中：凝膠蛋白質考馬斯亮藍染色操作步驟以及說明
更新時間：2015-08-03 點擊次數：4390次上海信帆生物代理銷售基質金屬蛋白酶MMP2/9酶譜法試劑盒，現貨供應，歡迎。
常規考馬斯亮藍SDS-PAGE 凝膠蛋白質染色是實驗室常用的凝膠染色方法。銀染方法雖然靈敏度
高，但所需試劑復雜并且有毒有害，操作步驟繁瑣，難以控制獲得好的染色效果。
染色步驟：
1. 此染色液即為工作液，使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養皿中以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝
膠，并緩慢搖動2h；
2. 傾去染色液，用脫色液沖洗凝膠；
3. 以脫色液覆蓋凝膠，緩慢搖動2h，傾去脫色液，再加入新脫色液進行脫色，直至獲得清晰的
藍色的條帶和干凈的背景（通常此過程需要2～4h，也可脫色過夜至清晰的藍色的條帶和干凈
的背景）；
4. 對凝膠進行分析和照相，凝膠可放置在7％的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置（P2000）對
凝膠進行處理后保存。
安全性：含有甲醇，無特殊毒性，按一般化學品操作規程處理。
說明：
1. 染色液配方：0.25g 考馬斯亮藍R250+420ml 甲醇+100ml 冰乙酸，定容至1000ml，混合1h 后用
Whatman 1 號濾紙過濾，于室溫可無限期保存；
2. 脫色液配方：冰醋酸:甲醇:水＝7:5:88（V:V:V）；
3. 保存液：7％冰醋酸；
4. 凝膠染色之后，染色液可以回收利用，裝入新容器內，室溫或4 oC 保存，可反復使用2-4 次。
