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MMP-2 ,MMP-9活性檢測試劑盒(明膠酶譜法)檢測原理
更新時間:2015-06-23 點擊次數:2073次 酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖 系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,zui后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在 藍色背景下可出現白色條帶,條帶的強弱與MMP-2和MMP-9活性成正比。
復性原理:在電泳過程中,SDS與樣品中的MMPs結合(當然是可逆性結合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使MMPs不能發揮其分解明膠的作用,而只有當將膠置Trition中洗脫(是放在搖床上搖,30min/次,做2次或15min/次,4次。靜置于Trition中是不妥的。)時,由于SDS被Trition結合而去除,從而使MMPs恢復了活性。