產品目錄 CATALOG
ELISA實驗四種常用的方法優點與缺點
更新時間:2024-10-14 點擊次數:89次 ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。酶聯免疫吸附試驗的標準程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體,形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶標記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質,作用后產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關系,依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。以下是ELISA實驗四種常用的方法優點與缺點分析比較:
1、直接法
優點:操作簡單快捷,步驟少,實驗周期更短,避免了交叉反應,測定結果不容易出錯
缺點:酶標記抗體成本高,不是所有抗體都適用
2、間接法
優點:高靈敏度,更經濟,更靈活,利用了酶標二抗,信號得到放大
缺點:可能存在交叉反應,實驗周期較長
3、雙抗體夾心法
優點:高特異性和高靈敏度,能夠與復雜的樣品基質兼容,一步法和二步法各有特點,一步法操作簡便但易出現非特異性干擾,二步法可以減少非特異性干擾,提高實驗的準確性
缺點:實驗流程較長,需要使用酶標抗體和固相載體,成本較高
4、競爭法
優點:適用于小分子抗原,數據再現性高
缺點:整體的敏感性和特異性都較差,需要對樣本進行稀釋.