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ELISA實(shí)驗(yàn)中如何正確采取標(biāo)本

更新時(shí)間:2022-09-26   點(diǎn)擊次數(shù):462次

ELISA實(shí)驗(yàn)中如何正確采取標(biāo)本


標(biāo)本的采取和保存


大部分ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅
細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中,溶血標(biāo)本
可能會(huì)增加非特異性顯色。


血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源
性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在
冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20
℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。


混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操
作,也可加入適當(dāng)防腐劑。抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。


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